細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測試劑盒檢測原理

細(xì)胞周期是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，主要分為細(xì)胞分裂間期與有絲分裂期（M期）兩個階段；細(xì)胞間期主要由DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）組成，整個細(xì)胞周期變化順序可用G1→S→G2→M來表示。首先G1時期：細(xì)胞主要合成RNA和蛋白質(zhì)等物質(zhì)，為細(xì)胞進(jìn)入S期做好物質(zhì)和能量的準(zhǔn)備；隨后進(jìn)入S期：細(xì)胞開始進(jìn)行DNA和一些組蛋白等物質(zhì)合成，細(xì)胞DNA含量開始增加；最后到G2期：這時細(xì)胞DNA含量已經(jīng)變成了G1時期的2倍，并已經(jīng)停止了DNA的復(fù)制，為進(jìn)入有絲分裂期做大量的蛋白質(zhì)等物質(zhì)的合成；如果G0（細(xì)胞暫時停止分裂和分化期、靜止期）/G1期，細(xì)胞中DNA含量為1N；那么處于G2期的細(xì)胞中DNA含量為2N；而處于G1和G2時期之間的S期細(xì)胞，DNA含量在1N~2N之間；而凋亡的細(xì)胞，細(xì)胞核會發(fā)生濃縮和DNA片段化，導(dǎo)致部分基因組DNA片段丟失，所以其DNA含量是小于1N的，在流式檢測的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰，即凋亡細(xì)胞峰。因此，可根據(jù)細(xì)胞DNA的含量來判斷細(xì)胞所處的周期和狀態(tài)。

細(xì)胞凋亡也可以用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞光散射的變化來檢測。細(xì)胞發(fā)生凋亡時，由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細(xì)胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。凋亡前期，染色質(zhì)皺縮，細(xì)胞密度增加，前向角光散射色顯著降低；凋亡后期，細(xì)胞產(chǎn)生凋亡小體，前向角光散射和側(cè)向角光散色均顯著降低。

細(xì)胞周期與凋亡檢測試劑盒（Cell Cycle ａnd Apoptosis Analysis Kit）采用了經(jīng)典的碘化丙啶染色(Propidium staining)方法對細(xì)胞周期與凋亡進(jìn)行檢測分析。利用碘化丙啶能夠嵌入雙鏈DNA中，并使其產(chǎn)生熒光，并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比的特性；結(jié)合細(xì)胞不同周期中，DNA含量的規(guī)則變化，可以區(qū)分細(xì)胞處于的周期和狀態(tài)。本試劑盒可用于組織細(xì)胞、貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與凋亡檢測（如用于組織的細(xì)胞周期與凋亡檢測，則須把組織消化成單細(xì)胞狀態(tài)，才可進(jìn)行檢測）。